ГОСТ 27543-87
Группа Н49
МЕЖГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ
ИЗДЕЛИЯ КОНДИТЕРСКИЕ
Аппаратура, материалы, реактивы и питательные среды
для микробиологических анализов
Confectionery. Equipment, materials, reagents and culture media
for microbiological analyses
MКC 67.180.10
67.260
ОКСТУ 9109
Дата введения 1989-01-01
ИНФОРМАЦИОННЫЕ ДАННЫЕ
1. РАЗРАБОТАН И ВНЕСЕН Госагропромом СССР
2. УТВЕРЖДЕН И ВВЕДЕН В ДЕЙСТВИЕ Постановлением Государственного комитета СССР по стандартам от 23.12.87 N 4827
3. ВВЕДЕН ВПЕРВЫЕ
4. ССЫЛОЧНЫЕ НОРМАТИВНО-ТЕХНИЧЕСКИЕ ДОКУМЕНТЫ
Обозначение НТД, на который дана ссылка | Номер раздела, пункта |
ГОСТ 171-81 | Разд.4 |
ГОСТ 195-77 | Разд.4 |
ГОСТ 779-55 | Разд.4 |
ГОСТ 908-79 | Разд.4 |
ГОСТ 975-88 | Разд.4 |
ГОСТ 1172-93 | Разд.3 |
ГОСТ 1770-74 | Разд.2 |
ГОСТ 1935-55 | Разд.4 |
ГОСТ 2874-82 | 4.2 |
ГОСТ 3118-77 | Разд.4 |
ГОСТ 4025-95 | 1.2 |
ГОСТ 4159-79 | Разд.4 |
ГОСТ 4232-74 | Разд.4 |
ГОСТ 4233-77 | Разд.4 |
ГОСТ 4328-77 | Разд.4 |
ГОСТ 5556-81 | Разд.3 |
ГОСТ 6038-79 | Разд.4 |
ГОСТ 6672-75 | Разд.2 |
ГОСТ 6709-72 | 4.1, 4.2 |
ГОСТ 8273-75 | Разд.3 |
ГОСТ 9147-80 | Разд.2 |
ГОСТ 9284-75 | Разд.2 |
ГОСТ 9412-93 | Разд.3 |
ГОСТ 11027-80 | Разд.3 |
ГОСТ 12026-76 | Разд.3 |
ГОСТ 13739-78 | Разд.4 |
ГОСТ 13805-76 | Разд.4 |
ГОСТ 13867-68 | 4.1,4.2 |
ГОСТ 16280-2002 | Разд.4 |
ГОСТ 17206-96 | Разд.4 |
ГОСТ 18481-81 | 1.1 |
ГОСТ 19569-89 | 1.1 |
ГОСТ 19881-74 | 1.1 |
ГОСТ 20438-75 | Разд.4 |
ГОСТ 21239-93 | 1.2 |
ГОСТ 21240-89 | 1.2 |
ГОСТ 21241-89 | 1.2 |
ГОСТ 24104-88 | 1.1 |
ГОСТ 25336-82 | Разд.2 |
ГОСТ 25706-83 | 1.1 |
ГОСТ 27095-86 | Разд.4 |
ГОСТ 28498-90 | 1.1 |
ГОСТ 29227-91 | Разд.2 |
ТУ 3-3.154-80 | 1.1 |
ТУ 3-3.190-80 | 1.1 |
ТУ 3-3.193-80 | 1.1 |
ТУ 3-3.404-83 | 1.1 |
ТУ 3-3.986-81 | 1.1 |
ТУ 6-09-5313-86 | Разд.4 |
ТУ 6-09-5303-86 | Разд.4 |
ТУ 38 1051835-88 | Разд.3 |
5. Ограничение срока действия снято по протоколу N 3-93 Межгосударственного совета по стандартизации, метрологии и сертификации (ИУС 5-6-93)
6. ПЕРЕИЗДАНИЕ
Настоящий стандарт распространяется на кондитерские изделия и устанавливает перечень средств измерений, оборудования, инвентаря, лабораторной посуды, материалов, реактивов и питательных сред, необходимых для определения в кондитерских изделиях мезофильных аэробных и факультативно-анаэробных микроорганизмов, бактерий группы кишечных палочек, коагулазоположительных стафилококков, дрожжей и плесневых грибов.
1. АППАРАТУРА
1.1. Средства измерения и оборудование
Ареометр по ГОСТ 18481.
Баня водяная.
Весы лабораторные общего назначения, 2-го класса точности с НПВ 200 г по ГОСТ 24104* (для взвешивания реактивов).
________________
* С 1 июля 2002 года введен в действие ГОСТ 24104-2001 (здесь и далее).
Весы лабораторные общего назначения, 4-го класса точности с НПВ 200 г по ГОСТ 24104 (для взвешивания навесок продуктов).
Горелка газовая с регулированием подачи воздуха.
Гомогенизатор или смеситель лабораторный.
Дистиллятор электрический ДЭ-4 или другой марки.
Лупа складная с увеличением 4-10
Микроскоп световой биологический по ТУ 3-3.154, ТУ 3-3.190, ТУ 3-3.193, ТУ 3-3.404, ТУ 3-3.986.
Облучатель бактерицидный потолочный ОБП-300 или другой марки.
Плита электрическая или газовая 4-конфорная.
рН-метр по ГОСТ 19881.
Стерилизатор паровой медицинский по ГОСТ 19569*.
________________
* На территории Российской Федерации действует ГОСТ Р 51935-2002.
Термометры ртутные стеклянные лабораторные с диапазоном измерения от 0 до 55 °С, от 0 до 105 °С и от 0 до 100 °С по ГОСТ 28498.
Термостат электрический суховоздушный ТС-80 или другой марки.
Холодильник бытовой.
Часы песочные на 1, 2, 3, 5 и 10 мин.
Часы сигнальные или таймер.
Шкаф сушильный, позволяющий поддерживать температуру не ниже 160 °С.
Допускается применение импортных средств измерений и оборудования по классу точности не ниже отечественных.
1.2. Инвентарь
Бак оцинкованный из нержавеющей стали с крышкой, вместимостью 20 дм
Иглодержатель бактериологический.
Кастрюли эмалированные (для приготовления питательных сред).
Мясорубка бытовая с отверстиями диаметром не более 4 мм по ГОСТ 4025.
Ножницы медицинские по ГОСТ 21239.
Петля бактериологическая.
Пинцеты медицинские по ГОСТ 21241.
Скальпели и ножи медицинские по ГОСТ 21240.
Штативы для пробирок на 10, 20 и 40 гнезд.
2. ПОСУДА
Кружки фарфоровые вместимостью 500, 1000 и 2000 см
Воронки В-ХС по ГОСТ 25336.
Колбы конические Кн-1-250-19/26ТС, Кн-1-250-34/35ТС, Кн-1-250-45/40ТС, Кн-1-2000-24/29ТС, Кн-1-2000-29/32ТС, Кн-1-2000-34/35ТС по ГОСТ 25336.
Колба мерная 2-100-2 по ГОСТ 1770.
Колбы плоскодонные П-1-250-29/32ТС, П-1-250-34/35ТС, П-1-250-45/40ТС, П-1-2000-45/40ТС по ГОСТ 25336.
Мензурки вместимостью 100, 250, 500 и 1000 см
Пипетки 4-1-1, 4-1-2, 5-1-1, 5-1-2, 6-1-5, 6-1-10, 7-1-5, 7-1-10 по ГОСТ 29227.
Поплавки стеклянные для пробирок и колб размером 5
Пробирки цилиндрические П-1-16-150ТС по ГОСТ 25336.
Спиртовки СЛ-1, СЛ-2 по ГОСТ 25336.
Стаканы В-1-50ТС, В-1-100ТС по ГОСТ 25336 (для взвешивания навесок продуктов).
Стекла покровные для микропрепаратов по ГОСТ 6672.
Стекла предметные для микропрепаратов по ГОСТ 9284.
Ступки фарфоровые с пестиком вместимостью 300 и 500 см
Флаконы из темного стекла вместимостью 250 и 500 см
Цилиндр мерный 1-1000 по ГОСТ 1770.
Чашки биологические (Петри) ЧБН-1-100, ЧБН-2 по ГОСТ 25336.
Допускается применение импортной лабораторной посуды по классу точности не ниже отечественной.
Новую стеклянную посуду, предназначенную для микробиологических анализов, перед употреблением кипятят в подкисленной воде (раствор соляной кислоты с объемной долей 1-2%) в течение 15 мин, промывают водопроводной водой, затем ополаскивают дистиллированной водой, высушивают и стерилизуют в сушильном шкафу при 160-165 °С в течение 2 ч или в паровом стерилизаторе при (121±2) °С в течение 30 мин с последующим высушиванием.
3. МАТЕРИАЛЫ
Бинты марлевые медицинские по ГОСТ 1172.
Бумага индикаторная.
Бумага оберточная по ГОСТ 8273.
Бумага фильтровальная листовая по ГОСТ 12026.
Вата медицинская гигроскопическая по ГОСТ 5556.
Ерши и щетки (для мойки стеклянной посуды).
Карандаши восковые по стеклу.
Марля медицинская по ГОСТ 9412.
Мыло хозяйственное.
Пробки резиновые конусные по ТУ 38 1051835.
Проволока из тугоплавких материалов диаметром 0,3-0,5 мм (для изготовления бактериологических петель).
Ткань полотенечная по ГОСТ 11027.
Фартук прорезиненный или клеенчатый.
Халат белый хлопчатобумажный с косынкой или шапочкой.
Шпагат.
Порошки стиральные.
4. РЕАКТИВЫ И ПИТАТЕЛЬНЫЕ СРЕДЫ
Агар-агар в волокнах или порошке по ГОСТ 20438 или агар микробиологический по ГОСТ 17206, или агар пищевой по ГОСТ 16280.
Агар сухой Эндо.
Бульон питательный сухой.
Генциан фиолетовый, краситель.
Глюкоза по ГОСТ 6038 или глюкоза кристаллическая гидратная по ГОСТ 975.
Дрожжи хлебопекарные прессованные по ГОСТ 171.
Желчь крупного рогатого скота жидкая (свежая или консервированная медицинская) или сухая обезвоженная.
Йод по ГОСТ 4159.
Калий йодистый по ГОСТ 4232.
Кислота лимонная пищевая по ГОСТ 908.
Кислота соляная по ГОСТ 3118.
Кристаллический фиолетовый, индикатор.
Лактоза 1-водная.
Масло иммерсионное для микроскопии по ГОСТ 13739.
Мясо-говядина в полутушах и четвертинах по ГОСТ 779 или мясо-баранина в тушах по ГОСТ 1935, или мясо-конина в полутушах и четвертинах по ГОСТ 27095.
Натрия гидроокись по ГОСТ 4328.
Натрий сернистокислый безводный по ГОСТ 195 или 7-водный по ТУ 6-09-5313.
Натрий хлористый по ГОСТ 4233.
Пептон сухой ферментативный для бактериологических целей по ГОСТ 13805.
Плазма крови кроличья сухая.
Питательный агар сухой.
Питательный агар сухой КД.
Спирт этиловый ректификованный по ГОСТ 5962*.
________________
* На территории Российской Федерации действует ГОСТ Р 51652-2000.
Среда сухая Кесслер.
Среда сухая Кода.
Сусло-агар сухой.
Сусло солодовое (пивное) неохмеленное или виноградное.
Фенол по ТУ 6-09-5303-86.
Фуксин основной.
Экстракт дрожжевой в порошке или экстракт кормовых дрожжей.
Яйца куриные.
4.1. Приготовление растворов реактивов
Для приготовления растворов реактивов применяется:
вода дистиллированная по ГОСТ 6709;
реактивы по ГОСТ 13867, х.ч. и ч.д.а.
4.1.1. Раствор гидроокиси натрия с массовой долей 10%
В мерную колбу вместимостью 100 см
Приготовленный раствор стерилизуют при (121±2) °С в течение 20 мин.
Раствор применяют для подщелачивания питательных сред.
4.1.2. Раствор кристаллического фиолетового с массовой долей 1%
В мерную колбу с притертой пробкой вместимостью 100 см
Приготовленный раствор используют для добавления в питательную среду с целью подавления роста грамположительных микроорганизмов.
4.1.3. Раствор лимонной кислоты с массовой долей 20%
В мерную колбу с притертой пробкой вместимостью 100 см
Приготовленный раствор применяют для подкисления питательных сред.
4.1.4. Раствор пептонно-солевой
пептон - 1,0 г
хлористый натрий - 8,5 г
В эмалированную кастрюлю или колбу вместимостью 2000 см
Приготовленный раствор разливают по 90 см
Применяют раствор для приготовления разведений взвешенной навески продукт
а.
4.1.5. Раствор физиологический
В колбу вместимостью 100 см
Раствор применяют для разведения сухой кроличьей плазмы и для приготовления яично-желточной взвеси.
4.1.6. Растворы реактивов для окраски микропрепаратов по Граму
4.1.6.1. Карболовый раствор фиолетового генциана
фиолетовый генциан - 1,0 г
фенол - 5,0 г
этиловый спирт с массовой долей 96% - 10,0 см
В фарфоровую ступку вместимостью 300 см
Приготовленный раствор хранят во флаконе из темного стекла с притертой пробкой.
4.1.6.2. Раствор Люголя
йод - 1,0 г
йодистый калий - 2,0 г.
Во флакон из темного стекла с притертой пробкой вместимостью 500 см
4.1.6.3. Фуксин Циля
фенол - 5,0 г
основной фуксин - 1,0 г
этиловый спирт с массовой долей 96% - 10,0 см
В фарфоровую ступку вместимостью 300 см
Приготовленный раствор хранят во флаконе из темного стекла с притертой пробкой.
4.1.7. Для окраски микропрепаратов по Граму ускоренным методом используют следующие реактивы:
4.1.7.1. Реактив 1
кристаллический фиолетовый - 0,5 г
этиловый спирт с массовой долей 96% - 100,0 см
В мерную колбу с притертой пробкой вместимостью 100 см
Приготовленный реактив хранят во флаконе из темного стекла с притертой пробкой.
4.1.7.2. Реактив 2
йодистый калий - 0,4 г
основной фуксин - 0,1 г
йод - 0,2 г
этиловый спирт с массовой долей 96% - 100,0 см
В мерную колбу с притертой пробкой вместимостью 100 см
Приготовленный реактив хранят во флаконе из темного стекла с притертой пробкой.
4.2. Приготовление питательных сред
Питательные среды приготовляют в эмалированной или стеклянной посуде. Для приготовления питательных сред применяются:
вода дистиллированная по ГОСТ 6709;
вода питьевая по ГОСТ 2874*;
________________
* На территории Российской Федерации действует ГОСТ Р 51232-98.
реактивы по ГОСТ 13867, х.ч. и ч.д.а.
4.2.1. Водный агар
В колбу вместимостью 2000 см
Приготовленную среду стерилизуют при (121±2) °С в течение 20 мин.
Применяют водный агар для наслаивания на застывшую питательную среду с посевным материалом с целью предотвращения роста бактерий, образующих на поверхности агаризованной питательной среды сплошной налет.
4.2.2. Бульон мясо-пептонный с агаром
Для приготовления среды используют бульон или мясную воду.
Раствор бульона приготовляют из сухого питательного бульона производственного изготовления (состав и способ приготовления см. на этикетке упаковки).
Для приготовления мясной воды в кастрюлю вместимостью 2000 см
Для приготовления питательной среды в кастрюлю вместимостью 2000 см
Среду применяют для культивирования мезофильных аэробных и факультативно-анаэробных микроорганизмов.
4.2.3. Бульон мясо-пептонный с агаром, глюкозой и дрожжевым экстрактом
В кастрюлю вместимостью 2000 см
Для приготовления жидкого дрожжевого экстракта в кастрюлю вместимостью 3000 см
Добавляют дрожжевой экстракт в питательные среды как источник веществ, способствующих регенерации поврежденных клеток микроорганизмов.
Для приготовления питательной среды смесь бульона или мясной воды с пептоном, хлористым натрием, глюкозой и дрожжевым экстрактом доводят до кипения и кипятят на слабом огне в течение 1-2 мин, периодически помешивая. Смесь фильтруют через бумажный фильтр в цилиндр вместимостью 1000 см
Среду используют для культивирования мезофильных аэробных и факультативно-анаэробных микроорганизмо
в.
4.2.4. Среда Кесслер с лактозой
Для приготовления среды используют сухую питательную среду Кесслер производственного изготовления по нормативно-технической документации (состав и способ приготовления см. на этикетке упаковки).
Жидкую среду Кесслер можно приготовить следующим образом.
В кастрюлю вместимостью 2000 см
Среда применяется для культивирования бактерий группы кишечных пал
очек.
4.2.5. Агар Эндо
Для приготовления среды используют сухой агар Эндо производственного изготовления (состав и приготовление см. на этикетке упаковки).
Сухой агар Эндо можно заменить средой следующего состава:
мясо-пептонный агар расплавленный
[рН среды (7,7±0,1)] | - 1000,0 см | |||
водный раствор лактозы с массовой долей 20% | - 50,0 см | |||
спиртовой раствор основного фуксина с массовой долей 10% | - 5,0 см | |||
водный раствор сернистокислого натрия с массовой долей 10% | - 100,0 см |
Для приготовления раствора лактозы с массовой долей 20% в мерную колбу вместимостью 100 см
К 1000 см
В колбу вместимостью 250 см
К охлажденному до 45 °С - 50 °С мясо-пептонному агару с лактозой добавляют смесь растворов основного фуксина и сернистокислого натрия, взбалтывают и разливают по чашкам Петри в затемненном помещении (на свету питательная среда краснеет).
Готовая среда в горячем состоянии красноватого цвета, в холодном - бледно-розовая или бесцветная.
Среду, разлитую в стерильные чашки Петри, можно хранить при (6±2) °С не более 10 сут.
Применяют среду для выявления бактерий группы кишечных палочек
.
4.2.6. Яично-желточный солевой агар
Приготовление яично-желточной взвеси.
Из куриного яйца, протертого с поверхности этиловым спиртом с объемной долей 70%, извлекают стерильной пипеткой вместимостью 10 см
Приготовление питательной среды.
Непосредственно перед проведением анализа растворяют хлористый натрий в 1000 см
Среду в чашках Петри можно хранить при (6±2) °С не более 5 сут.
Применяют среду для выявления коагулазоположительных стафилококков и лецитиназной активности микроорганизмов.
4.2.7. Солевой бульон
Для приготовления питательной среды используют раствор сухого питательного бульона производственного изготовления (состав и способ приготовления см. на этикетке упаковки) или мясную воду, приготовленную по п.4.2.2.
В кастрюлю вместимостью 2000 см
Солевой питательный бульон используется в качестве накопительной среды для выявления коагулазоположительных стафилококков.
4.2.8. Сахарный бульон (бульон с глюкозой)
Для приготовления питательной среды используют раствор сухого питательного бульона производственного изготовления (состав и способ приготовления см. на этикетке упаковки) или мясную воду, приготовленную по п.4.2.2.
В кастрюлю вместимостью 2000 см
Питательный бульон с глюкозой используется в качестве накопительной среды для выявления коагулазоположительных стафилококков.
4.2.9. Сусло-агар
Для приготовления питательной среды используется сухой сусло-агар производственного изготовления (состав и способ приготовления см. на этикетке упаковки).
Среду сусло-агар можно приготовить следующим образом.
В кастрюлю вместимостью 2000 см
Среду применяют для культивирования дрожжей и плесневых грибов.
4.2.10. Пептонно-глюкозный агар (среда Сабуро)
В кастрюлю вместимостью 2000 см
Среду применяют для культивирования дрожжей и плесневых грибов.
Необходимое значение рН растворов реактивов и питательных сред устанавливают при комнатной температуре с помощью раствора гидроокиси натрия с массовой долей 10% или раствора лимонной кислоты с массовой долей 20%.
Допускается проводить ориентировочное определение рН растворов и питательных сред с помощью индикаторной бумаги, позволяющей определять рН с интервалом 0,2 единицы.
Текст документа сверен по:
Сахарные кондитерские изделия. Технические условия.
Методы анализа: Сб. ГОСТов. -
М.: ИПК Издательство стандартов, 2004